荧光标记时,肽和修饰标记的染料之间需要加一个间隔吗?
多数染料属于大分子量芳香族氨基酸,在多肽中引入这一类大型分子,为了避免多肽与标签之间发生相互作用,维持蛋白的构象及其生物学活性,我们推荐引入一个可弯曲的间隔区,比如Ahx, Ahx是一个含有6碳分子的环状结构,可以维持荧光标签的稳定性。否则,FITC很容易结合多肽序列中的半胱氨酸残基或者赖氨酸残基。
通常情况下,生物素、FITC一类的染料既可以标记在蛋白的氨基端也可以标记在蛋白的羧基端。然而,为了在*短时间内,*便捷又高效地合成多肽,***推荐客户选择标记在氨基端。因为一个多肽的合成往往是从羧基端开始的,这样一来,氨基端的修饰便成为*后一个环节,不需要再进行特别的结合作用。反之,羧基端修饰需要额外的环节,因此过程更加复杂。