用哪种溶剂溶解合成肽一直是困扰多肽工作者的一个难题。根据不同的氨基酸序列,可以参考以下方法来溶解合成肽。*好是先将少量肽用水溶液溶解,不要一次将全部样品都溶解掉。
1. 将酸性氨基酸Asp (D),Glu (E)和C端-COOH的值定为-1。
2. 将碱性氨基酸Arg (R),Lys (K),His (H)的值定为+1。
3. 计算肽中全部电荷量。
4. 如果肽的全部电荷为正值,则肽呈碱性,可以先用水溶解。如果肽不溶于水,可以用10%乙酸或者更高浓度的乙酸溶解。如果肽一点都不溶,加入TFA(<50ml)助溶,并用去离子水稀释至1ml。
5. 如果肽的全部电荷为负值,则肽呈酸性,可以先用水溶解。如果肽不溶于水,加入NH4OH(<50ml) 助溶,并用去离子水稀释至1ml。
6. 如果肽的全部电荷为0,则肽呈中性。中性肽需要用乙腈、甲醇、异丙醇等有机溶剂来溶解,也可以加入变性剂(如尿素、盐酸胍等)。
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