多肽固相合成（SPPS）和长肽合成的混合技术

多肽固相合成是当今 流行的多肽合成方法。C端的前面一个氨基酸被耦合在活化的载体（如聚苯乙烯）上。树脂既可作为c端保护基，同时又可将增长的肽产品从在合成过程中形成的反应混合物中快速分离出来。

我们经常有客户对超长多肽的合成咨询，比如长度在100到200个氨基酸的长肽的合成，其实200个氨基酸已经是属于蛋白质的范畴了。成功合成169个氨基酸的蛋白证明我们的合成技术在现有的技术平台是完全能胜任长肽的合成的，我们的技术平台PeptideSyn通常都是合成50个氨基酸以下的多肽，但是通过我们对多肽链接技术的改造和针对长肽的 ，我们现在能成功合成蛋白质长度的多肽。

通过化学合成的办法获得长达100到200个氨基酸的蛋白，比其它方法相比要跟快捷和便宜，况且化学合成的蛋白是按照氨基酸的顺序来进行的，不会出现错误或者变异的情况。化学合成还能加入一些别的办法不能进行的修饰，比如取代常规氨基酸为D型氨基酸，增加某个位点的磷酸化或者甲基化。化学合成还不需要额外增加纯化蛋白用的标签比如6HIS或者FLAG等。在蛋白表达的方法上，反而是基因合成，质粒构建，蛋白表达和纯化等工作占据了绝大多数的时间和成本。因此长肽的化学合成方法是广大科研工作值得尝试的途径。

固相合成和混合技术策略

优势

• 长肽被快速合成：Fmoc/Boc法
• 生产周期短
• 工艺自动化和高效性
• 没有需分离的中间体

• 原料成本高，易造成原料浪费。
• 杂质较复杂：包括有插入、截断、删除、被修改或未被修改的氨基酸。

成功案例 1

成功的在四周内合成了一个169个氨基酸的多肽 (M.W. 18716.41, 83% purity)。多肽合成的成功率取决于多肽的序列，有时候150个氨基酸的多肽有时候比一个70个氨基酸的多肽更容易合成。通常利用Boc/Bzl进行氨基酸的保护对于长的多肽会比较有帮助，由于多肽产品的切割需要比较强的酸比如TFMSA和HF，所以在去保护的时候有些有活性的中间产物很容易和一些氨基酸进行反应，我们对原料和酸碱的选择能很大程度的解决这些问题，因此我们的PeptideSyn技术平台对于长肽的合成起到了突破性的作用。

HPLC Results

Mass Spectrometry Results

成功案例 2

某客户要求合成一高度疏水的含68个氨基酸的多肽(纯度为85%)，N端进行FITC标记。此多肽在4周内成功合成。

HPLC Results

Mass Spectrometry Results